Tissue targets and phylogenetic characteristic of the Enzootic Nasal Tumour Virus (ENTV) infecting Sahelian sheep
Tissus cibles et caractéristiques phylogénétiques du virus de la tumeur nasale enzootique (ENTV) chez la brebis sahélienne
Résumé
We analyzed the nucleotide sequence and tissue distribution of the Enzootic Nasal Tumour Virus (ENTV) circulating in Sahelian breeds of sheep in West Africa. New ENTV specific primers were designed in the variable region spanning from the end of the viral transmembrane (TM) gene to the U3 region of the long terminal repeat (LTR). These primers selectively amplified a fragment of the ENTV genome from the tumour tissues of sheep affected with enzootic nasal adenocarcinoma (ENA). ENTV nucleotides sequences obtained from two separate sheep were 99.5% homolog. The sequence analysis revealed a genome clustering more closely with ENTV-1 (94% homology) than with ENTV-2 (84% homology). An internal primer was designed for enhanced detection after hemi-nested PCR (hn-PCR). Tissues exploration using hn-PCR revealed the presence of provirus in the retropharyngeal lymph node draining the nasal region and in the healthy lung tissue from ENA-sheep. Despite this improved detection assay, the ENTV genome remained undetectable from the peripheral blood leukocytes of ENA sheep. The observed tissue distribution is consistent with the ENTV-1 dissemination pattern. These data are relevant to the preclinical and antemortem diagnosis of sheep ENA.
Nous avons analysé la séquence nucléotidique et la distribution tissulaire du virus de la tumeur nasale enzootique (ENTV) qui sévit chez les souches sahéliennes de mouton d’Afrique de l’Ouest. Des oligonucléotides spécifiques du ENTV ont été conçus dans la région variable qui s’étend de la fin du gène codant la protéine virale trans-membranaire (TM) à la région U3 du LTR. Ces amorces permettent d’amplifier sélectivement un fragment du génome viral à partir du tissu tumoral d’ovin atteint d’Adénocarcinome Nasal Enzootique (ENA). Les séquences virales obtenues de deux animaux sont à 99,5 % homologues. Leur analyse a révélé un génome plus proche du ENTV-1 (homologie 94 %) que du ENTV-2 (homologie 84 %). Un «primer» interne a été conçu pour accroître le pouvoir de détection après PCR nichée (hn-PCR). L’exploration des tissus par cette méthode a révélé la présence de pro-virus dans le ganglion rétropharyngé qui draine la région nasale, ainsi que dans le poumon sain de mouton atteint. Malgré cette capacité accrue de détection, le génome du ENTV est resté indétectable depuis les leucocytes circulants de mouton atteint. La distribution tissulaire observée est en accord avec la dissémination du ENTV-1. Ces résultats ont des implications pour le diagnostic pré-clinique et ante-mortem de la tumeur nasale enzootique du mouton.