Un modèle de barrière hémato-testiculaire in vitro pour l'évaluation de la reprotoxicité chez le mâle
Abstract
Le développement de nouvelles méthodes alternatives représente une priorité pour les études de reprotoxicité depuis que les scientifiques se sont accordés sur l’utilité d’une conception de batteries de tests toxicologiques in vitro pour remplacer les études in vivo. Notre travail consiste ainsi à développer un modèle in vitro du système de défense des testicules, la barrière hémato-testiculaire (BHT). L’objectif est de reproduire le plus fidèlement possible la composition, l'organisation et la fonction principale de la BHT de rat : les fonctions de barrière et de spermatogenèse. Le concept ainsi développé est basé sur une culture en 3 dimensions effectuée dans une chambre bicamérale contenant des cellules péritubulaires sous le dessous des inserts et un mélange de cellules de Sertoli, de cellules germinales et de matrice extracellulaire artificielle sur le dessus.
Le modèle présente une organisation cellulaire semblable à celle des tubules séminifères, avec une polarisation des cellules de Sertoli et des cellules germinales au centre de la structure. Une barrière physique avec un compartiment basal et apical est également créée, confirmée par la présence de jonctions serrées entre les cellules de Sertoli et entre les cellules péritubulaires. Les relations entre ces cellules et entre la matrice et les cellules influencent l’efficacité des jonctions et la production de signaux intracellulaires au cours de la culture. De plus, dès le 8ème jour de culture, la détection de cellules haploïdes démontre la différenciation des cellules germinales, confirmant la présence d’une spermatogenèse in vitro (Legendre et al, 2010).
Dans un souci de validation et de valorisation du modèle, des expositions in vitro ont été amorcées pour évaluer l'effet de perturbateurs endocriniens sur les fonctions de barrière et/ou de spermatogenèse. De cette façon, ce nouveau modèle se présente comme un système in vitro de choix pour l’étude de la reprotoxicité de certains composés chimiques.
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