B. S. Ahloowalia, M. Maluszynski, and K. Nichterlein, Global impact of mutation-derived varieties, Euphytica, vol.135, pp.187-204, 2004.

S. Albrecht, C. Mollers, and G. Robbelen, Selection in vitro for erucic-acid content in segregating populations of microspore-derived embryoids of Brassica napus, Plant Breeding, vol.114, pp.210-214, 1995.

A. A. Alissa, R. Jonard, H. Serieys, and P. Vincourt, La culture d'embryons isolés in vitro dans un programme d'amélioration du Tournesol. Compte Rendu de l'Académie des sciences, série III, vol.302, pp.161-164, 1986.

. Anses, Avis relatif à l'utilisation des variétés rendues tolérantes aux herbicides cultivées en France, p.256, 2019.

C. Auerbach, Chemical mutagenesis, Biological Reviews, vol.24, pp.355-391, 1949.

R. Augé, J. Beauchesne, J. Boccon-gibod, L. Decourtye, B. Digat et al., La culture in vitro et ses applications horticoles, 1989.

S. Austin, M. A. Baer, and J. P. Helgeson, Transfer of resistance to potato leaf roll virus from Solanum brevidens into Solanum tuberosum by somatic fusion, Plant Sci, vol.39, pp.75-81, 1985.

S. Austin, E. Lojkowska, M. K. Ehlenfeldt, A. Kelman, and J. P. Helgeson, Fertile interspecific somatic hybrids of Solanum : a novel source of resistance to Erwinia soft rot, Phytopathology, vol.78, pp.1216-1220, 1988.

M. W. Bairu, A. O. Aremu, and J. Van-staden, Somaclonal variation in plants: causes and detection methods, Plant Growth Regulation, vol.63, pp.147-173, 2011.

F. Barro, J. Fernandez-escobar, . De-la, M. Vega, M. et al., Doubled haploid lines of Brassica carinata with modified erucic acid content through mutagenesis by EMS treatment of isolated microspores, Plant Breeding, vol.120, pp.262-264, 2001.

F. Barro, J. Fernandez-escobar, M. De-la-vega, M. , and A. , Modification of glucosinolate and erucic acid contents in doubled haploid lines of Brassica carinata by UV treatment of isolated microspores, Euphytica, vol.129, pp.1-6, 2002.

M. E. Beaith, R. S. Fletcher, and L. S. Kott, Reduction of saturated fats by mutagenesis and heat selection in Brassica napus L, Euphytica, vol.144, pp.1-9, 2005.

E. J. Belfield, X. Gan, A. Mithani, C. Brown, C. Jiang et al., Genome-wide analysis of mutations in mutant lineages selected following fast-neutron irradiation mutagenesis of Arabidopsis thaliana, Genome Research, vol.22, pp.1306-1315, 2012.

L. Bergmann, A new technique for isolating and cloning cells of higher plants, Nature, vol.184, pp.648-649, 1959.

W. D. Beversdorf and L. S. Kott, An in vitro mutagenesis/selection system for Brassica napus, Iowa State Journal of Research, vol.61, pp.435-443, 1987.

P. S. Carlson, H. H. Smith, and R. D. Dearing, Parasexual interspecific plant hybridization, Proc Natl Acad Sci, vol.69, pp.2292-2294, 1972.

E. C. Cocking, A method for the isolation of plant protoplasts and vacuoles, Nature, vol.187, pp.962-963, 1960.

H. R. Cui, Q. Y. Wu, and B. Zhu, Specific-locus amplified fragment sequencing reveals spontaneous single-nucleotide mutations in rice OsMsh6 mutants, 2017.

A. Daurova, D. Daurov, D. Volkov, A. Karimov, Z. Abai et al., Mutagenic treatment of microspore-derived embryos of turnip rape (Brassica rapa) to increase oleic acid content, 2020.

. Engl, Detection of food and feed plant products obtained by new mutagenesis techniques -Report by the European Network of GMO Laboratories, 2019.

. Fao/iaea, Manual on Mutation Breeding -Third edition, 2018.

A. M. Ferrie, D. C. Taylor, S. L. Mackenzie, G. Rakow, J. P. Raney et al., , 2008.

, Microspore mutagenesis of Brassica species for fatty acid modifications: a preliminary evaluation, Plant Breeding, vol.127, pp.501-506

C. S. Gager and A. F. Blakeslee, Chromosome and gene mutations in Datura following exposure to radium rays, Proc Natl Acad Sci, vol.13, pp.75-79, 1927.

H. Gaul, Use of induced mutants in seed-propagated species, Proc Symposium on mutation and plant breeding Pub, vol.891, pp.206-251, 1961.

R. J. Gautheret, Sur la possibilité de réaliser la culture indéfinie de tissus de tubercules de carotte, C R Acad Agr, vol.208, pp.118-120, 1939.

G. Haberlandt, Kulturversuche mit isolierten Pflanzenzellen, Sitzungsber Akad Wiss Wien Math-Naturwiss, vol.111, pp.69-92, 1902.

E. Hannig, Zur Physiologie pflanzlicher Embryonen. I. Über die Kultur von Cruciferenembryonen ausserhalb des Embryosacks, Bot Ztg, vol.62, pp.45-80, 1904.

G. W. Haughn, J. Smith, B. Mazur, and C. Somerville, Transformation with a mutant Arabidopsis acetolactate synthase gene renders tobacco resistant to sulfonylurea herbicides, Mol Gen Genet, vol.211, pp.266-271, 1988.

, Avis du Comité scientifique du Haut Conseil des biotechnologies sur les nouvelles techniques d'obtention de plantes (new plant breeding techniques -NPBT) en réponse à la saisine du 22 février, p.90, 2016.

D. J. Heinz, M. , and G. W. , Morphologic, cytogenetic and enzymatic variation in Saccharum species hybrid clones derived from callus tissue, American Journal of Botany, vol.58, pp.257-262, 1971.

I. M. Henry, U. Nagalakshmi, M. C. Lieberman, K. J. Ngo, K. V. Krasileva et al., L'induction expérimentale de mutations chez les plantes cultivées, C R Acad Agr, vol.47, pp.694-704, 1961.

F. Hsu, M. Gohain, A. Allishe, Y. Huang, J. Liao et al., Dynamics of the methylome and transcriptome during the regeneration of rice, vol.2, p.14, 2018.

M. Hu, H. Pu, L. Kong, J. Gao, W. Long et al., , 2015.

W. Huang, R. F. Lyman, R. A. Lyman, M. A. Carbone, S. T. Harbison et al., Spontaneous mutations and the origin and maintenance of quantitative genetic variation, vol.5, p.23, 2016.

G. Jander, S. R. Baerson, J. A. Hudak, K. A. Gonzalez, K. J. Gruys et al., , 2003.

, Ethylmethanesulfonate saturation mutagenesis in Arabidopsis to determine frequency of herbicide resistance, Plant Physiology, vol.131, pp.139-146

A. Janska, S. Zelenkova, M. Klima, M. Vyvadilova, and I. T. Prasil, Freezingtolerance and proline content of in vitro selected hydroxyproline resistant winter oilseed rape, Czech Journal of Genetics and Plant Breeding, vol.46, pp.35-40, 2010.

S. M. Kaeppler, H. F. Kaeppler, R. , and Y. , Epigenetic aspects of somaclonal variation in plants, Plant Molecular Biology, vol.43, pp.179-188, 2000.

H. P. Kharkongar, V. K. Khanna, W. Tyagi, M. Rai, and T. Ngasepam, Wide hybridization and embryo-rescue for crop improvement in Solanum, 2013.

J. Kim, Chromatin remodeling and epigenetic regulation in plant DNA damage repair, Int J Mol Sci, vol.20, 2019.

M. Krasovec, S. Sanchez-brosseau, and G. Piganeau, First estimation of the spontaneous mutation rate in diatoms, Genome Biology and Evolution, vol.11, pp.1829-1837, 2019.
URL : https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-02165657

H. Krishna, M. Alizadeh, D. Singh, U. Singh, N. Chauhan et al., Somaclonal variations and their applications in horticultural crops improvement, 2016.

M. Lemay, D. Torkamaneh, G. Rigaill, B. Boyle, A. O. Stec et al., Screening populations for copy number variation using genotyping-by-sequencing: a proof of concept using soybean fast neutron mutants, BMC Genomics, vol.20, 2019.
URL : https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-02625904

C. Li, R. Zhang, X. Meng, S. Chen, Y. Zong et al., , 2020.

, Targeted, random mutagenesis of plant genes with dual cytosine and adenine base editors, Nature Biotechnology

S. Liu, H. Wang, J. Zhang, B. D. Fitt, Z. Xu et al., In vitro mutation and selection of doubled-haploid Brassica napus lines with improved resistance to Sclerotinia sclerotiorum, Plant Cell Rep, vol.24, pp.133-144, 2005.

Y. Lu, S. Dai, A. Gu, M. Liu, Y. Wang et al., , 2016.

J. M. Lucht, B. Mauch-mani, H. Y. Steiner, J. P. Metraux, J. Ryals et al., Pathogen stress increases somatic recombination frequency in Arabidopsis, Nature Genetics, vol.30, pp.311-314, 2002.

C. M. Mccallum, L. Comai, E. A. Greene, and S. Henikoff, Targeting Induced Llocal Lesions IN genomes (TILLING) for plant functional genomics, Plant Physiology, vol.123, pp.439-442, 2000.

S. L. Mcclinchey and L. S. Kott, Production of mutants with high cold tolerance in spring canola (Brassica napus), Euphytica, vol.162, pp.51-67, 2008.

F. C. Mellor, S. , and R. , In Applied and fundamental aspects of plant cell, tissue and organ culture, pp.616-635, 1977.

C. Miguel and L. Marum, An epigenetic view of plant cells cultured in vitro: somaclonal variation and beyond, J Exp Bot, vol.62, pp.3713-3725, 2011.

C. Möllers, B. Rücker, D. Stelling, and A. Schierholt, In vitro selection for oleic and linoleic acid content in segregating populations of microspore derived embryos of Brassica napus, Euphytica, vol.112, pp.195-201, 2000.

F. Mondeil, Irradiation de microspores en culture d'anthères -essai d'une nouvelle technique d'obtention de mutations immédiatement décelables et fixables (application à Nicotiana tabacum), 1974.

, Ann Amelior Plantes, vol.24, pp.1-11

G. Morel, M. , and C. , Guérison de dahlias atteints d'une maladie à virus, Comptes Rendus Hebdomadaires des Séances de l'Académie des Sciences, vol.235, pp.1324-1325, 1952.

S. Ossowski, K. Schneeberger, J. I. Lucas-lledo, N. Warthmann, R. M. Clark et al., The rate and molecular spectrum of spontaneous mutations in Arabidopsis thaliana, Science, vol.327, pp.92-94, 2010.

J. T. Parrilla-doblas, T. Roldan-arjona, R. R. Ariza, and D. Cordoba-canero, Active DNA demethylation in plants, Int J Mol Sci, vol.20, p.19, 2019.

G. Pelletier, C. Primard, F. Vedel, P. Chetrit, R. Remy et al., , 1983.

, Intergeneric cytoplasmic hybridization in cruciferae by protoplast fusion, Mol Gen Genet, vol.191, pp.244-250

R. Rahbari, A. Wuster, S. J. Lindsay, R. J. Hardwick, L. B. Alexandrov et al., Timing, rates and spectra of human germline mutation, Nature Genetics, vol.48, pp.126-133, 2016.

J. Reinert, Uber die Kontrolle der Morphogenese und die Induktion von Adventivembryonen an Gewebekulturen aus Karotten, Planta, vol.53, pp.318-333, 1959.

A. Ricroch, J. Boussard, Y. Dattée, A. Gallais, P. Gate et al., Rapport -Les biotechnologies vertes : un enjeu stratégique pour l'avenir de la filière semencière française / Report -Green biotechnologies: a strategic issue for the future of the French seed industry Report, Notes Académiques de l'Académie d'agriculture de France/ Academic Notes from the French Academy of Agriculture, pp.1-20, 2018.

L. H. San and Y. Dattée, Variabilité des haploïdes doublés par androgenèse et gynogenèse "in vitro, Bulletin de la Société Botanique de France Actualités Botaniques, vol.132, pp.23-33, 1985.

S. T. Schultz, M. Lynch, and J. H. Willis, Spontaneous deleterious mutation in Arabidopsis thaliana, Proc Natl Acad Sci, vol.96, pp.11393-11398, 1999.

X. Serrat, R. Esteban, N. Guibourt, L. Moysset, S. Nogues et al., EMS mutagenesis in mature seed-derived rice calli as a new method for rapidly obtaining TILLING mutant populations, Plant Methods, vol.10, 2014.

K. Shirasawa, H. Hirakawa, T. Nunome, S. Tabata, and S. Isobe, Genome-wide survey of artificial mutations induced by ethyl methanesulfonate and gamma rays in tomato, Plant Biotechnol J, vol.14, pp.51-60, 2016.

F. Skoog and C. O. Miller, Chemical regulation of growth and organ formation in plant tissues cultured in vitro, Symp Soc Exp Biol, vol.11, pp.118-130, 1957.

M. J. Smulders and G. J. De-klerk, Epigenetics in plant tissue culture, Plant Growth Regulation, vol.63, pp.137-146, 2011.

L. J. Stadler, Mutations in barley induced by X-rays and radium, Science, vol.68, pp.186-187, 1928.

S. C. Stelpflug, S. R. Eichten, P. J. Hermanson, N. M. Springer, and S. M. Kaeppler, Consistent and heritable alterations of DNA methylation are induced by tissue culture in maize, Genetics, vol.198, pp.209-218, 2014.

H. Stroud, B. Ding, S. A. Simon, S. Feng, M. Bellizzi et al., Plants regenerated from tissue culture contain stable epigenome changes in rice, 2013.

E. B. Swanson, M. P. Coumans, G. L. Brown, J. D. Patel, and W. D. Beversdorf, The characterization of herbicide tolerant plants in Brassica napus L. after in vitro selection of microspores and protoplasts, Plant Cell Rep, vol.7, pp.83-87, 1988.

E. B. Swanson, M. J. Herrgesell, M. Arnoldo, D. W. Sippell, and R. S. Wong, Microspore mutagenesis and selection: Canola plants with field tolerance to the imidazolinones, Theor Appl Genet, vol.78, pp.525-530, 1989.

I. Szarejko and B. P. Forster, Doubled haploidy and induced mutation, Euphytica, vol.158, pp.359-370, 2007.

H. Takahashi, T. Fukuhara, H. Kitazawa, and R. Kormelink, Virus latency and the impact on plants, 2019.

I. Takebe, G. Labib, and G. Melchers, Regeneration of whole plants from isolated mesophyll protoplasts of tobacco, Naturwissenschaften, vol.58, pp.318-320, 1971.

C. Tan, X. Zhang, Y. Wang, D. Wu, M. I. Bellgard et al., Characterization of genome-wide variations induced by gamma-ray radiation in barley using RNA-Seq, BMC Genomics, vol.20, 2019.

, CS) du HCB à partir du travail préparatoire du groupe de travail d'experts (voir Annexe 3), examiné et adopté en séance du 29 juin 2020 24 en présentiel et en visioconférence, sous la présidence du Dr Jean-Christophe Pagès

C. S. Le and . Du, HCB est un comité pluridisciplinaire composé de personnalités scientifiques nommées par décret au titre de leur spécialité en relation avec les missions du HCB

F. Angevin, C. Bagnis, A. Bar-hen, M. Barny, P. Boireau et al., Barbara Demeneix (démissionnaire) 25, Eliane Meurs, Nadia Naffakh, Didier Nègre

, Ils sont également interrogés sur l'existence d'éventuels conflits d'intérêts avant l'examen de chaque dossier, Les membres du CS du HCB remplissent annuellement une déclaration publique d'intérêts

C. Bagnis, M. Barny, P. Boireau, B. Chauvel, C. Collonnier et al., Membres du CS présents et représentés en présentiel ou en visioconférence lors de la discussion de ce texte en séance du 29 juin 2020 : Frédérique Angevin

, Mention ajoutée le 15 juillet 2020 à 21h. Barbara Demeneix a démissionné le 3 décembre 2018. N'ayant pas été remplacée à ce jour

, Groupe de travail du CS et travail préparatoire à l'avis, Annexe, vol.3

, CS) est composé de trois membres du CS, Claudine Franche, Philippe Guerche et Michel Renard, sélectionnés pour leurs compétences en biologie moléculaire et cellulaire végétale, génétique et amélioration des plantes. Les travaux du groupe de travail ont été suivis par Jean-Christophe Pagès, Président du Comité scientifique et Président par intérim du HCB

, Le groupe de travail a consulté les experts supplémentaires suivants au titre de leur expertise, pour compléter ses compétences dans les domaines en lien avec la saisine

C. Caranta, Directrice de recherche INRAE (Génétique et biologie végétale)

M. Causse, Directrice de recherche INRAE (Génétique et amélioration des fruits et légumes)

É. Chevreau, Directrice de recherche INRAE (Biotechnologie des arbres fruitiers)

Y. Chupeau, Directeur de recherche honoraire INRAE

J. David, Professeur Montpellier Supagro-INRAE-CIRAD (Génétique et évolution des plantes cultivées

A. Gallais, Professeur honoraire AgroParisTech (Génétique et amélioration des plantes)

E. Guiderdoni and C. Chercheur, Biologie cellulaire et moléculaire)

L. Hibrand-saint-oyant, Ingénieure de Recherche INRAE hors classe (Biotechnologies et génétique de plantes ornementales

J. Noyer, Directeur Adjoint du Département Bios CIRAD

G. Pelletier, Directeur de recherche honoraire INRAE

. Jean-christophe, Pagès a également été sollicité par les membres du groupe de travail pour son expertise en génétique moléculaire

, Les experts externes ont apporté leur expertise en réponse aux sollicitations du groupe de travail mais n'ont pas participé à la rédaction du présent avis

. Le-groupe-de-travail-s'est-réuni-en-visioconférence, Il a auditionné en visioconférence Jean-Louis Noyer le 17 juin, vol.10

, Des réunions mixtes avec le groupe de travail du CEES se sont tenues en visioconférence le 10 juin (lancement des travaux de la saisine) et le 18 juin (présentations des questions traitées, méthodologies de travail et échanges entre les membres des deux groupes de travail)

, Le groupe de travail a présenté ses travaux (question posée et méthodologie suivie) en assemblée plénière du HCB le 24 juin et reçu les premières contributions des membres du HCB à cette occasion

, A la suite de l'assemblée plénière, le groupe de travail a finalisé son rapport, qui a été soumis en tant que projet d'avis du CS pour un examen en séance du CS le, vol.29

, Les principales techniques de culture in vitro sont : ? Micropropagation La micropropagation ou multiplication végétative in vitro ou consiste à prélever sur la plante un organe ou morceau d'organe (bourgeon, morceau de feuille ou de racine, ?) à le cultiver en conditions aseptiques sur des milieux choisis qui permettront soit le développement de bourgeons préexistants

, ? Culture de méristèmes

, Les méristèmes sont formés de cellules indifférenciées ou peu différenciées, à activité mitotique importante, qui peuvent, en se multipliant, donner naissance à tous les tissus de la plante. Les méristèmes sont situés à l'apex des tiges et des rameaux

?. Sauvetage,

, soit parce qu'il ne pourrait pas se développer dans les tissus maternels, par exemple lorsqu'il résulte d'un croisement interspécifique. ? Protoplastes Les protoplastes sont des cellules végétales débarrassées de leur paroi pecto-cellulosique suite à des traitements enzymatiques. Si les protoplastes sont souvent isolés à partir de feuilles, ils peuvent aussi être obtenus à partir de cals, de suspensions cellulaires ou d'organes végétaux tels que les tiges, les racines ou les fleurs. Sous l'influence de traitements physiques ou chimiques, il est possible de faire pénétrer dans ces cellules des molécules diverses telles que des acides nucléiques, Le sauvetage d'embryons consiste à prélever un embryon quelques jours après la fécondation et à le cultiver in vitro, soit pour accélérer les cycles végétatifs

?. Haplo,

, Au cours du développement de la plante, on peut obtenir le doublement à l'identique du génome haploïde par application d'un composé chimique, la colchicine. Cette technique est aussi utilisée pour doubler le stock chromosomique des hybrides issus de croisements d'espèces non compatibles afin d'obtenir des graines. C'est le cas des Triticales, par exemple, qui sont des hybrides artificiels créées par croisement entre le blé et le seigle et dont le stock chromosomique est doublé par utilisation de la colchicine, L'haplo-diploïdisation consiste à obtenir des individus haploïdes doublés à partir de cellules reproductrices mâle (androgenèse) ou femelle (gynogenèse), 1993.

Y. Cauderon and A. Et-cauderon, Le Triticale : première céréale créée par l'homme, Natures-Sciences-Sociétés, vol.1, issue.2, 1993.