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Master thesis

Extraction des polysomes, des mRNA polyadénylés de cellules en élongation de racines de Vicia faba et synthèse du cDNA

Résumé : Les racines de Fève (Vicia faba) présentent des cellules méristématiques et des cellules en élongation le long d’un même axe. Elles constituent donc un modèle intéressant pour étudier l’expression génétique pendant la différenciation cellulaire. Notre objectif était d’obtenir la synthèse du cDNA à partir des RNA messagers des cellules en élongation. L’extraction de polysomes et de RNA polysomiques non dégradés de la zone d’élongation a été contrariée par la présence d’une très forte activité RNasique contrairement à celle des cellules méristématiques. Nous montrons que l’emploi des inhibiteurs usuels (héparine, sulfate de dextrane) ainsi que celui de KCN 10 mM, empêche en partie cette dégradation. Nous avons pu avec l’emploi de KCN 20mM maîtriser l’action des ribonucléases présentes dans le milieu. L’utilisation de cycloheximide montre qu’un " run off" des polysomes ne se produit pas lors de l’extraction. Les mRNA polyadénylés ont été extraits et les cDNA synthétisés et analysés. Leur taille est correcte et correspond à celle des cDNA couramment synthétisés. Ces résultats sont particulièrement intéressants dans la mesure où les seules synthèses de cDNA réalisées chez les végétaux supérieurs jusqu’à présent, concernaient les feuilles de Nicotiana tabacum et les embryons de Triticum aestivum.
Mots-clés : Vicia faba mRNA RNase cDNA
Document type :
Master thesis
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https://hal.inrae.fr/hal-03169664
Contributor : Victor Vaillant <>
Submitted on : Monday, March 15, 2021 - 3:06:46 PM
Last modification on : Tuesday, March 23, 2021 - 10:56:02 PM
Long-term archiving on: : Wednesday, June 16, 2021 - 6:56:13 PM

File

DEA Victor VAILLANT.pdf
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Identifiers

  • HAL Id : hal-03169664, version 1

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Citation

Victor Vaillant. Extraction des polysomes, des mRNA polyadénylés de cellules en élongation de racines de Vicia faba et synthèse du cDNA. Biologie végétale. 1979. ⟨hal-03169664⟩

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