Simplification de la méthode de préparation des embryons équins avant cryoconservation par vitrification - INRAE - Institut national de recherche pour l’agriculture, l’alimentation et l’environnement
Journal Articles NOV'AE Year : 2023

Simplification of the method to prepare equine embryos before cryopreservation by vitrification

Simplification de la méthode de préparation des embryons équins avant cryoconservation par vitrification

Abstract

Embryo cryopreservation combined with embryo transfer is a very useful reproductive biotechnology for the equine sector. Until now, the conventional technique used required the purchase of expensive equipment and lengthy technical training. In addition to a microscope and two micromanipulators, two kinds of micropipettes connected to screw syringes were necessary, one to hold the embryo under air suction and one under oil. These constraints made the technique difficult to use in the field by the collection and transfer centres of the equine industry. At INRAE Nouzilly, we have developed a technique based on the freehand introduction of an aspiration micropipette through the capsule of the embryo, under a stereomicroscope. This is followed by the removal of the blastocoelic liquid via the micropipette. The operation is performed under oil, with the micropipette held by the operator and connected to a screw syringe. This technique was the subject of a declaration of invention and innovation. We have shown that this technique can be easily performed by a laboratory technician without experience in embryo micromanipulation and that it can achieve results in terms of in vitro embryo survival as good as the conventional technique. These two advantages make it possible to envisage the easy and effective use of this technique by equine embryo collection/transfer centres and the equine industry in general.
La cryoconservation d’embryons associée au transfert d’embryons est une biotechnologie de la reproduction très utile pour la filière équine. Jusqu’à présent, la technique conventionnelle utilisée nécessitait l’achat d’un matériel coûteux et un long apprentissage technique. Outre un microscope et deux micromanipulateurs, deux sortes de micropipettes reliées à des seringues à vis étaient nécessaires, une pour maintenir l’embryon sous aspiration d’air et une, sous huile. Ces contraintes rendaient cette technique difficilement utilisable sur le terrain par les centres de collectes et de transferts de la filière équine. À INRAE Nouzilly, nous avons développé une technique dont le principe est basé sur l’introduction à main levée d’une micropipette à travers la capsule de l’embryon, sous loupe. Elle est suivie du retrait du liquide blastocœlique, toujours à main levée, sous loupe, via cette micropipette, dite d’aspiration, sous huile, tenue par l’opérateur et reliée à une seringue à vis. Cette technique a fait l’objet d’une déclaration d’invention et d’innovation. Nous avons montré qu’elle pouvait être facilement prise en main par un technicien de laboratoire novice en micro manipulation d’embryons et qu’elle permettait d’obtenir d’aussi bons résultats de survie embryonnaire in vitro que la technique conventionnelle. Ces deux atouts permettent d’envisager une utilisation aisée et efficace par les centres de collectes/transferts d’embryons équins et la filière équine en général.
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hal-04620508 , version 1 (21-06-2024)

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Fabrice Reigner, Florence Guignot. Simplification de la méthode de préparation des embryons équins avant cryoconservation par vitrification. NOV'AE, 2023, 10, pp.1-12. ⟨10.17180/novae-2023-NO-art10⟩. ⟨hal-04620508⟩
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