[Isoprostanes, biomarkers of lipid peroxidation in humans. Part 2: Quantification methods]
Les isoprostanes, biomarqueurs de peroxydation lipidique chez l'homme. Partie 2 : méthodes de quantification
Résumé
The isoprostanes are a new class of natural products produced in vivo by a non-enzymatic free-radical-induced peroxidation of polyunsaturated fatty acids. The quantification of these compounds represents a reliable and useful index of lipid peroxidation and oxidant stress in vivo. Then, a large amount of works has been done in the field of isoprostane analysis, but till now, no standardized method seems to emerge. Indeed, described methodologies differ either in the sample preparation steps or in the detection techniques or both. Extraction and purification procedures are often critical and time-consuming, requiring successive chromatographic steps and these procedures lead to a substantial loose of target compounds. Moreover, two main analytical approaches have been adopted for IsoP measurement: immunological methods or mass spectrometry. Some discussion about the methodology used for measurement of isoprostane is important. This review will aim to present and compare different methods developed nowadays for extraction, purification and analysis of F2-iPs in various biological samples.
Les isoprostanes sont une nouvelle classe de molécules naturelles formées in vivo par un mécanisme radicalaire non enzymatique de peroxydation lipidique des acides gras polyinsaturés. La quantification de ces composés comme marqueur de peroxydation lipidique in vivo apparaît comme une avancée importante dans l’exploration du rôle du stress oxydant en pathologie humaine. Un grand nombre de travaux a été réalisé dans le domaine de l’analyse des isoprostanes. Cependant, ces travaux diffèrent dans la préparation de l’échantillon comme pour le choix de la technique analytique et aucune méthode standard n'émerge. Les procédures d’extraction et de purification qui nécessitent une succession de techniques chromatographiques, sont longues, difficiles à mettre en œuvre et ne donnent que de faibles taux de récupération. Par ailleurs, deux méthodes sont couramment utilisées pour la quantification des isoprostanes : la spectrométrie de masse et les méthodes immunologiques. L’objectif de cette revue et de faire le point sur les différentes méthodes publiées à ce jour sur l’extraction, la purification et l’analyse des isoprostanes dans les différents échantillons biologiques.