Feasibility of fluorescent detection of pathogens on pork carcasses
Faisabilité de la détection par fluorescence de pathogène sur des carcasses de porc
Résumé
The direct immunofluorescent detection of pathogens on pork skin is evaluated. Calibrate contamination of pork skin with SalmonellaTyphimurium (ST) and Listeria monocytogenes(Lm) is developed in 2h at 4°C. Then a specific indirect immunofluorescent staining protocol is optimized in order to obtain specific and intensive signals able to be detected by electronic cameras (deported microscopy). Despite the individual staining of ST and Lm is possible on pork skin and is specific and bright, the deported microscopy failed to detect these particles. After respectively 3 and 6h, we obtain micro-colonies of STand Lm. Due to the limited power of the video camera used, only the microscope permits the detection on the skin. However, our work gives standard conditions to mime the pathogens contamination and staining directly on a biological matrix such as pork skin. This work is a first step in the development of direct and rapid detection of pathogens on biological matrix.
La détection immunofluorescente directe des microbes pathogènes sur la peau de porc est évaluée. La Calibration de la contamination de la peau de porc avec SalmonellaTyphimurium (ST) et Listeria monocytogenes (Lm) est développé en 2h à 4°C. Un protocole de marquage immunofluorescent indirect spécifique est optimisé afin d'obtenir des signaux spécifiques d'intensité capables d'être détecté par une caméra (microscopie déportée). En dépit du marquage individuelle de ST et de LM sur la peau de porc spécifique et lumineux, la microscopie déportée n'a pas détecté ces particules. Après respectivement 3 et 6h, nous obtenons des microcolonies de STand LM dues à la puissance limitée de l'appareil-photo visuel utilisé, seulement le microscope permet la détection sur la peau. Cependant, notre travail donne des conditions standard simulant la contamination de microbes pathogènes et le marquage directement sur une matrice biologique telle que la peau de porc. Ce travail est une première étape dans le développement de la détection directe et rapide des microbes pathogènes sur la matrice biologique.