Description du sujet. Les espèces de Pleurotus sont cultivées sur des substrats lignocellulosiques, où des champignons contaminants tels que Trichoderma spp. sont communs. Un substrat sélectif pour Pleurotus doit fournir les conditions nécessaires à la protection contre les contaminants. Des études ont montré que Paenobacillus polymyxa et d'autres bactéries thermophiles peuvent participer à la sélectivité du substrat de culture pour Pleurotus, mais on sait peu de choses sur les communautés bactériennes impliquées dans ces différents substrats. Objectifs. Évaluer l'effet de l'inoculation de P. polymyxa dans un substrat de culture sur la productivité de P. pulmonarius et sur la protection contre Trichoderma. Méthode. De la paille d'orge inoculée avec P. polymyxa et de la paille non inoculée (témoin) ont été utilisées après 0, 3 ou 5 jours de fermentation avant un traitement thermique pour produire le substrat de culture. Le contenu microbiologique avant et après traitement thermique, la colonisation mycélienne par P. pulmonarius et Trichoderma viride en compétition et le rendement de P. pulmonarius ont été évalués. Résultats. Nous avons observé que l'inoculation avec P. polymyxa augmentait le nombre de bactéries cultivables et modifiait la composition de la communauté microbienne. Elle diminue la capacité de colonisation de T. viride et favorise la croissance mycélienne. Cependant, le rendement en champignons a été affecté. Les rendements plus élevés de P. pulmonarius ont été obtenus dans le substrat témoin où aucune contamination de Trichoderma spp. n’a été observée. Conclusions. L'ajout de P. polymyxa a modifié la succession microbiologique naturelle lors d’une fermentation de paille d'orge pendant 5 jours, favorisant la compétitivité de P. pulmonarius par rapport à T. viride. La fermentation de la paille d'orge pendant les 3 jours qui suivent un traitement thermique est bénéfique pour le rendement et la protection de P. pulmonarius contre T. viride.