Method for selecting a permissive cell line for replicating avian viruses
Procédé de sélection d'une lignée cellulaire permissive pour la réplication de virus aviaires
Résumé
The present invention relates to a method for obtaining an untransformed avian cell line enabling in vitro avian virus replication. Said method includes the following steps: a) culturing avian embryonic stem cells in the presence of a stroma for at least 3 days; b) culturing for at least 2 days in a medium having a low serum concentration; c) culturing for at least 2 days in a medium having a low serum concentration containing 1 to 10 mM of hexamethyleme bisacetamide (HMBA); d) culturing for at least 10 days in a medium having a low serum concentration; and e) culturing or freezing an avian cell line enabling avian virus replication. The invention also relates to the resulting cell line and to the use thereof in vaccine preparations
La présente invention concerne un procédé d'obtention d'une lignée cellulaire aviaire non transformée permettant la réplication de virus aviaires in vitro, comprenant les étapes suivantes : a) Mise en culture de cellules souches embryonnaires aviaires en présence d'un stroma pendant au moins 3 jours; b) Culture dans un milieu à faible concentration de sérum pendant au moins 2 jours; c) Culture dans un milieu à faible concentration de sérum comprenant entre 1 et 10 mM de hexaméthylène bisacétamide (HMBA), pendant au moins 2 jours; d) Culture dans un milieu à faible concentration de sérum pendant au moins 10 jours; e) Culture ou congélation d'une lignée cellulaire aviaire permettant la réplication de virus aviaires. L'invention est également relative à la lignée cellulaire ainsi obtenue, et à son utilisation dans des préparations vaccinales.