Etude du système AGR par caractérisation de mutants de Listeria monocytogènes - INRAE - Institut national de recherche pour l’agriculture, l’alimentation et l’environnement Accéder directement au contenu
Rapport Année : 2012

Etude du système AGR par caractérisation de mutants de Listeria monocytogènes

Maud Darsonval

Résumé

L’adaptation des bactéries à leur environnement fait intervenir différents mécanismes dont la communication cellulaire. Chez Listeria monocytogenes, le système agr est le seul système de communication cellulaire actuellement décrit. L’implication du système agr dans l’adaptation de L. monocytogenes aux changements de conditions environnementales a été étudiée au travers la caractérisation de deux mutants DG342M et DG343M. L’analyse des séquences et des transcrits par RTqPCR a montré que l’insertion du mariner avait un effet polaire sur l’expression du gène codant une phosphodiestérase (lmo2642), enzyme responsable de l’hydrolyse de l’AMPc. L’analyse a également montré que le mutant DG343M possédait, un 2ème mariner au niveau du gène codant un antiterminateur putatif (lmo2099). L’effet polaire de l’insertion du mariner sur l’expression du gène de la phosphodiestérase a été confirmé par RTqPCR. L’impact de ces mutations sur l’expression du système agr a été analysé en utilisant un système rapporteur double (β-galactosidase et GFP) et la quantification des transcrits pas RTqPCR. Les résultats obtenus ont montré que les mutations provoquaient l’augmentation modérée du système agr en phase stationnaire. La caractérisation phénotypique des mutants a montré un impact sur leur croissance et leur capacité à former un biofilm dans différents modèles de culture de biofilm sur surfaces abiotiques (polystyrène et verre) en conditions statiques et dynamiques (0,5 Dynes) et que DG342M et DG343M étaient différents d’EGD-e. Les différences observées dans notre cas seraient dues au dérèglement du métabolisme central de la cellule par l’accumulation d’AMPc, plutôt qu’à l’augmentation de l’expression d’agr. En outre, la virulence des souches ne semblaient pas affectées. En revanche, les deux mutants différaient quant à leur capacité à coloniser les racines de fétuques. En effet, alors que le mutant simple DG342M montrait un défaut de capacité de colonisation de la rhizosphère, le mutant double DG343M ne semblait pas affecté, ce qui indiquait un effet compensateur de la part de la 2nde mutation (lmo2099). L’ensemble des résultats suggéraient pour la 1ère fois un rôle de signalisation de l’AMPc chez L. monocytogenes.
Fichier non déposé

Dates et versions

hal-02809497 , version 1 (06-06-2020)

Identifiants

  • HAL Id : hal-02809497 , version 1
  • PRODINRA : 271591

Citer

Maud Darsonval. Etude du système AGR par caractérisation de mutants de Listeria monocytogènes. [Stage] Université de Bourgogne (UB), FRA.; Ecole Doctorale Environnements – Santé.; Université de Bourgogne Franche-Comté (COMUE) (UBFC), FRA. 2012, 29 p. ⟨hal-02809497⟩
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