La glande mammaire se développe de manière cyclique à partir de cellules souches et progénitrices, en réponse à une régulation hormonale complexe. Plusieurs articles ont souligné le rôle que pouvaient jouer les microARN à la fois dans le maintien et la maturation des cellules souches. L’organisation spatiale du noyau, qui participe à la régulation l’expression des gènes et change au cours de la différenciation, n’a pas encore été étudiée dans ces cellules. Chez la génisse, les cellules progénitrices de la glande mammaire peuvent être identifiées sur les coupes de tissu par coloration à la fuchsine basique. Nous avons mis au point la détection de microARN par hybridation in situ sur cryo-coupes à l’aide de sondes oligonucléotidiques modifiées. L’expression de plusieurs microARN, notamment miR-21 et miR-205, a été étudiée au cours du développement de la glande mammaire de la vache et de la brebis. Mir-21 est un microARN oncogénique (oncomir) fortement exprimé dans de nombreux cancers et notamment les cancers du sein. MiR-205 a été montré par plusieurs équipes comme étant fortement exprimé dans les progénitrices mammaires chez la souris. Parallèlement, nous avons utilisé l’immunofluorescence sur cryo-coupes pour localiser les compartiments nucléaires, notamment les domaines d’hétérochromatine potentiellement impliqués dans l’épigénétique des cellules progénitrices. Nous avons montré qu’un simple marquage de l’ADN au DAPI permettait de distinguer les cellules progénitrices des cellules épithéliales en cours de différenciation, sur la base de la forme et de l’organisation interne des noyaux. L’identification des types cellulaires est optimale lorsque le tissu est inclus en paraffine. Les conditions d’hybridation in situ et d’immunofluorescence sont en cours d’optimisation afin d’examiner l’expression des microARN et l’organisation des noyaux à partir des coupes de tissu mammaire de génisse préparées avec cette méthode d’inclusion.