Objectif-Introduction : Les animaux de compagnie sont considérés comme un réservoir potentiel de bactéries résistantes aux antibiotiques notamment aux céphalosporines de dernières générations. L’objectif de cette étude était de déterminer le portage intestinal de souches d’Escherichia coli résistantes aux céphalosporines de dernières générations (C3/4G) chez le cheval en France et de caractériser les déterminants génétiques de cette résistance. Matériels et méthodes : Sept-cent-trente-huit chevaux de 41 élevages et centres équestres français ont été échantillonnés pendant l’été 2015. La présence d’E. coli résistants aux céphalosporines de dernières générations a été recherchée dans les crottins. Les gènes de résistance aux C3/4G ont été déterminéss par PCR et séquençage. Les plasmides porteurs de gènes BLSE et/ou céphalosporinase AmpC ont été transférés par conjugaison ou transformation afin d’être caractérisés par typage de réplicon, profil de restriction et multilocus sequence typing. Les souches d’E. coli resistantes aux C3/4G rations ont été caractérisées par champs pulsé, détermination du phylogroupe et du contenu en gènes de virulence. Results: Seize structures équestres hébergeaient au minimum un cheval porteur d’E. coli résistants aux C3/4G, ce qui représentait une prévalence de 7,9% de portage parmi les chevaux échantillonnés. Cinquante-une souches distinctes d’E. coli résistantes aux C3/4G ont été incluses dans l’analyse moléculaire de la résistance. Toutes ces souches présentaient une grande diversité de profil de macrorestriction en champs pulsé XbaI, appartenaient majoritairement au phylogroupe B1 et ne possédaient pas les gènes majeurs de virulence testés pour les animaux suggérant qu’il s’agit de souches commensales non pathogènes. Les BLSE du groupe CTX-M étaient largement prédominante (blaCTX-M-1, n=35; blaCTX-M-2, n=8; blaCTX-M-14, n=2). Les gènes BLSE/AmpC ont été localisés sur différents plasmides appartenant aux groupes d’incompatibilité IncHI1, IncI1, IncN, et IncY. Les gènes BLSE blaCTX-M-1 et blaCTX-M-2 étaient principalement portés par des plasmides IncHI1. Conclusion: Cette étude originale a mis en évidence un portage significatif d’E. coli producteur de BLSE chez le cheval sain en France. Les plasmides porteurs de gènes BLSE sont les acteurs majeurs de la dissémination de la résistance aux C3/4G dans le microbiote intestinal du cheval.