La membrane vitelline (MV) de l’œuf de poule est une membrane protéique acellulaire située à l’interface du blanc et du jaune. En reproduction aviaire, elle est impliquée dans l’interaction entre l’ovocyte et les spermatozoïdes au moment de la fécondation, dans le développement embryonnaire précoce ainsi que dans la protection physique et antimicrobienne de l’embryon. Elle contribue de ce fait à la qualité des œufs à couver et au bon développement des embryons ainsi qu’à la qualité des œufs de consommation (non fécondés). La MV est constituée d’une couche interne (MVI) en contact avec le jaune et d’une couche externe (MVE) en contact avec le blanc. À ce jour, environ 140 protéines différentes ont été identifiées dans la MV ; cependant, la distribution de ces protéines entre la MVI et la MVE reste à élucider. La présente étude vise à enrichir le répertoire des protéines connues dans la MV et à comparer la composition en protéines de la MVI et de la MVE afin de préciser leurs fonctions respectives. La MVI et la MVE ont été séparées manuellement à partir de MV d'œufs fraîchement pondus et les protéines de ces deux couches ont été solubilisées indépendamment et analysées par SDS-PAGE et GeLC-MS / MS. Plus de 550 protéines ont été identifiées dans l'ensemble de la MV. Environ 410 et 340 protéines ont été identifiées dans la MVI et la MVE, respectivement, dont certaines sont retrouvées dans les deux couches tandis que d’autre sont spécifiques de l’une ou l’autre des deux couches. Les données préliminaires résultant de l'annotation fonctionnelle des protéines (ontologie des gènes / bibliographie) révèlent la présence de nombreuses protéines associées non seulement à la fécondation et à la défense antimicrobienne, mais aussi à de nombreuses autres fonctions biologiques telles que l’adhérence et la migration cellulaires, le métabolisme et la morphogenèse, etc. Les résultats de cette étude témoignent de la complexité des rôles joués par la MV dans l’œuf et le développement embryonnaire précoce de l’oiseau. Ces résultats sont actuellement complétés par une analyse expressionnelle des protéines de la MV afin de préciser leur lieu et leur spécificité tissulaire de synthèse.