Les DGAT (diacylglycérol acyltransférase) catalysent la synthèse de triglycérides (TAG), forme de stockage de l'énergie du monde vivant. Les DGAT3, découvertes en 2006, sont un isoforme de la famille d'enzymes DGAT, exclusives au règne végétal et solubles. La DGAT3 se démarque par la présence d'un domaine semblable à celui des ferrédoxines, lui permettant de se lier à un centre fer-soufre, potentiellement via 4 cystéines très conservées chez cette famille d'enzymes. La DGAT3 de la plante modèle Arabidopsis thaliana ainsi que des mutants de troncature de cette enzyme ont été étudiés dans le cadre d'une thèse entre 2013 et 2016. Seule la forme complète maintient une activité enzymatique de synthèse des triglycérides. Sa solubilité facilite son étude, mais elle est sujette à une dégradation rapide après purification. L'objectif de mon stage est de trouver une DGAT3 plus stable afin d'être en mesure de la caractériser. Un nouveau mutant de troncature et un mutant de substitution des cystéines conservées de l'enzyme d'A.thaliana, ainsi que la DGAT3 d'autres espèces (Arachis hypogaea, l'arachide, et Amborella trichopoda, une plante fossile) ont été étudiés. Le mutant de troncature confirme que la région N-terminal est responsable de l'instabilité de l'enzyme. Le mutant de substitution permet de préciser que l'enzyme est autolysée dans la bactérie, que les cystéines sont indispensables à la fixation du centre Fe-S et que ce dernier semble jouer un rôle dans la réaction de synthèse des TAG. Contrairement à la DGAT3 d'A.hypogaea, celle d'A.trichopoda est exprimée en grande quantité, stable et liée à un centre Fe-S. Des essais de thermophorèse ont permis d'identifier des ligands susceptibles d'être des substrats ou modulateurs de l'activité. La DGAT3 pourrait avoir des substrats et activités supplémentaires, qui restent à déterminer.