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Thèse

Effets d'un terminateur de replication sur la stabilite des plasmides chez escherichia coli

Résumé : Des réarrangements génétiques, dont des délétions, sont produits par recombinaison illégitime. Différents mécanismes correspondant à des erreurs d'enzymes qui coupent et joignent l'ADN ou qui le répliquent seraient à l'origine de ces réarrangements. Lorsque la réplication de l'ADN est arrêtée, des structures aptes à recombiner sont générées. Nous avons testé l'éventuel rôle d'arrêts de réplication sur la formation de délétions. Des plasmides portant le terminateur de réplication TerB du chromosome d'Escherichia coli ont été utilisés comme modèles expérimentaux. Nous avons observé deux effets de TerB sur l'instabilité de ces plasmides. Un premier système expérimental a permis l'étude de délétions produites par jonction de séquences sans homologie. Des plasmides hybrides constitués par un phage filamenteux et un dérivé du plasmide pBR subissent des délétions. Une des séquences jointes lors de la délétion, l'origine de réplication du phage, est un site de coupure simpl-brin. Lorsque terB arrête la réplication de la molécule parentale, la majorité des délétions résultent de la jonction entre cette origine et le terminateur. Le blocage d'une fourche de réplication peut donc être à l'origine de réarrangements de l'ADN. TerB n'a en revanche pas d'effet direct sur la recombinaison entre de courtes séquences répétées plasmidiques. Cependant, en sa présence, la fréquence d'apparition de cellules recombinantes est cinq cents fois plus élevée. L'arrêt de la réplication provoque la diminution du nombre de copies du plasmide parental et ceci confère un avantage réplicatif au recombinant dépourvu du TerB.
Type de document :
Thèse
Liste complète des métadonnées

https://hal.inrae.fr/tel-02850805
Déposant : Migration Prodinra <>
Soumis le : dimanche 7 juin 2020 - 21:30:05
Dernière modification le : lundi 31 août 2020 - 15:32:03

Identifiants

  • HAL Id : tel-02850805, version 1
  • PRODINRA : 269818

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Citation

Hélène Bierne. Effets d'un terminateur de replication sur la stabilite des plasmides chez escherichia coli. Sciences du Vivant [q-bio]. Université Paris Diderot - Paris 7, 1993. Français. ⟨tel-02850805⟩

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