Contribution à l'étude de l'expression des gènes de végétaux supérieurs. Analyse des ARNm de racines de Fève et de différentes gliadines du Blé
Résumé
With the purpose of studying the extent of gene expression during cell differentiation, we have analysed diverse mRNA populations. First the polysomal polyadenylated RNA populations of meristematic, elongating and mature root cells, were analysed and compared by performing homologous and heterologous hybridization kinetics beetwen cDNA and mRNA. The three populations are distributed in three abundance classes (abundant, intermediate and rare). The comparison of the three phenotypes shows that a few abundant sequences can be regarded as meristematic-stage specific. Furthemore, cell elongation is accompagnied by the appearance of new transcripts belonging to the intermediate and rare classes. The same approach was used to investigate the complexity of mRNA isolated from the wheat endosperm. We demonstrate that 60% of the mRNA molecules being translated in the endosperm, corresponding to less than 1% of total diverse sequences, contain the information for approximately 75 superabundant species which would encode most of the seed storage proteins especially gliadins. We have cloned double stranded cDNA corresponding to these sequences and characterized several clones representing each of the three gliadins sub-families. Such clones can be used to determine the amino acid sequence and the secondary structure of these proteins. cDNA probes representing the major gliadins were used to follow the expression of corresponding genes during the development of the wheat seed. The gliadins structural genes will be a valuable substrate for studying the regulatory sequences involved in the control of such a multigenic family activity.
Dans le but d'étudier l'étendue de l'expression des gènes au cours de la différenciation cellulaire, nous avons analysé diverses populations d'ARNm. Tout d'abord, les populations d'ARN polyadénylé polysomique de cellules racinaires méristématiques, allongées et matures, ont été analysées et comparées en effectuant des cinétiques d'hybridation homologues et hétérologues entre l'ADNc et l'ARNm. Les trois populations sont réparties en trois classes d'abondance (abondante, intermédiaire et rare). La comparaison des trois phénotypes montre que quelques séquences abondantes peuvent être considérées comme spécifiques du stade méristématique. De plus, l'allongement cellulaire s'accompagne de l'apparition de nouveaux transcriptions appartenant aux classes intermédiaires et rares. La même approche a été utilisée pour étudier la complexité de l'ARNm isolé de l'endosperme de blé. Nous démontrons que 60% des molécules d'ARNm traduites dans l'endosperme, correspondant à moins de 1% du total des séquences diverses, contiennent les informations pour environ 75 espèces surabondantes qui coderaient pour la plupart des protéines de stockage des graines, en particulier les gliadines. Nous avons cloné de l'ADNc double brin correspondant à ces séquences et caractérisé plusieurs clones représentant chacune des trois sous-familles de gliadines. De tels clones peuvent être utilisés pour déterminer la séquence d'acides aminés et la structure secondaire de ces protéines. Des sondes d'ADNc représentant les gliadines majeures ont été utilisées pour suivre l'expression des gènes correspondants au cours du développement de la graine de blé. Les gènes de structure des gliadines seront un substrat précieux pour l'étude des séquences régulatrices impliquées dans le contrôle de l'activité d'une telle famille multigénique.
Domaines
Sciences du Vivant [q-bio]
Origine : Fichiers produits par l'(les) auteur(s)