Preservation of Agaricus subrufescens strains at low temperature by using cultures on sorghum grains
Preservación de cepas de Agaricus subrufescens a bajas temperaturas con cultivos en semillas de sorgo
Résumé
Background One of the main problems for the preservation of genetics resources of Agaricus subrufescens is to maintain the viability of the strains because the mycelium is very sensitive to cooling and therefore it ages rapidly. Aims Evaluate the viability of A. subrufescens strains stored as cultures on sorghum grain (spawn) at different temperatures. Methods Eighteen strains of A. subrufescens and three strains of Agaricus bisporus were studied. Spawn's viability was evaluated under the following conditions: (1) control at 25 °C (C), (2) cooling to 4 °C (R) and (3) freezing in liquid nitrogen at −196 °C (LN). Samples were recovered from week 4 every 2 weeks until week 12 and week 24 in C and R, whereas in LN samples were recovered at 4, 12 and 24 weeks. Viability was evaluated in 50 seeds, by strain and condition, recovering the mycelium in Petri dishes with potato dextrose agar medium (PDA). Mycelium growth was also evaluated on PDA after 14 days of recovery. Results Most strains showed 100% viability and they were recovered usually in 1 day. In LN the viability ranged between 84 and 100% depending on the strain, but in some cases recovery took more than 10 days. Mycelial growth decreased gradually over time and although the results show significant differences between treatments C and R, the decline is associated with ageing of the mycelium rather than the treatment itself. Conclusions Culture on sorghum grain and storage at low temperature is an interesting way to preserve genetic resources of A. subrufescens.
Antecedentes Uno de los principales problemas para la preservación de los recursos genéticos de Agaricus subrufescens es mantener la viabilidad de sus cepas ya que el micelio es sensible al frío y, en consecuencia, envejece rápidamente. Objetivos Evaluar la viabilidad de cepas de A. subrufescens y cepas de Agaricus bisporus en cultivos en semillas de sorgo a diferentes temperaturas. Métodos Se estudiaron 18 cepas de A. subrufescens y 3 cepas de A. bisporus. Se evaluó la viabilidad de A. subrufescens en las condiciones siguientes: (1) control a 25 °C (C), (2) enfriamiento hasta 4 °C (E) y (3) congelación en nitrógeno líquido a −196 °C (NL). Las muestras se recuperaron a las 4, 6, 8, 10, 12 y 24 semanas en C y E, mientras que en NL se recuperaron a las 4, 12 y 24 semanas. La viabilidad se evaluó en 50 semillas, por cepa y condición, en placas de Petri con medio de agar patata dextrosa (APD). También se evaluó el crecimiento de los micelios en APD tras obtención a los 14 días. Resultados La mayoría de cepas mostraron un 100% de viabilidad, y en general, se obtuvieron en 24 h. En la condición NL la viabilidad varió entre el 84 y el 100%, pero en algunos casos su obtención requirió > 10 días. El crecimiento de los micelios se redujo gradualmente con el tiempo y, aunque los resultados indicaron diferencias significativas entre los tratamientos C y E, este declive se asocia al envejecimiento del micelio más que al propio tratamiento. Conclusiones El cultivo en semillas de sorgo y el almacenamiento a bajas temperaturas es un medio eficaz para preservar los recursos genéticos de A. subrufescens.