La recherche sur la fonction de lactation et notamment sur le fonctionnement de la glande mammaire bovine est un outil indispensable pour inscrire la filière laitière dans la durabilité tout en lui permettant de faire face aux défis auxquels elle est confrontée comme l’arrêt des quotas laitiers ou la prise de conscience de l’impact environnemental de l’élevage bovin. La glande mammaire est en effet un organe dynamique (Capuco et al. 2001) composé de plusieurs populations cellulaires qui contribuent à la production du lait : les cellules épithéliales souches, progénitrices et sécrétrices, les cellules myoépithéliales, les fibroblastes, les adipocytes et les cellules endothéliales. Différents biomarqueurs de surface tels que CD49f, CD24, CD10 et EpCAM permettent de phénotyper ces cellules par cytométrie en flux. Dans cette étude, nous avons utilisé ces différents marqueurs pour phénotyper les cellules épithéliales souches, progénitrices, sécrétrices et myoépithéliales au cours de la lactation. Dans cet objectif, des explants de glande mammaire ont été prélevés par biopsies sur 5 vaches laitières primipares à 4 temps au cours de la lactation : J30, J60, J150 et J250. Après digestion et dissociation, les suspensions monocellulaires ont été marquées à l’aide d’anticorps spécifiques (CD49f, CD24, CD10 et EpCAM) et phénotypées par cytométrie en flux en excluant les cellules mortes. L’analyse des résultats montrent clairement des corrélations positives entre les populations cellulaires CD49f+ (cellules épithéliales) et CD49f+/EpCAM- (cellules progénitrices bipotentes) et la production laitière. Nous avons également mis en évidence une population impliquée dans le renouvellement mammaire (CD49f-/EpCAM-) qui diminue au cours de la lactation. Des analyses immunohistochimiques nous ont permis de montrer que le marqueur CD10 était spécifique des cellules myoépithéliales localisées en bordure des acini et que la population monomarquée (CD10+) ne variait pas significativement au cours de la lactation. Dans l’ensemble, les populations cellulaires liées aux cellules souches montrent peu de variations au cours de la lactation. Ces résultats suggérèrent ainsi que de nombreux types cellulaires mammaires seraient fixées au cours du développement de la glande mammaire et notamment dans la phase pré-pubère.