Recherche de marqueurs spécifiques des spermatogonies chez le poisson zèbre par les approches de qPCR et HIT
Résumé
Une sous-population de spermatogonies indifférenciées a été isolée par tri cellulaire
assisté de la fluorescence (FACS) à partir d’une lignée transgénique de zebrafish exprimant la
GFP sous le contrôle du promoteur du gène vasa. L’analyse du transcriptome par RNAseq
(Illumina) a permis de présélectionner une liste de 9 gènes dont l’expression était enrichie
dans ces cellules après le tri cellulaire. L’étude présentée a permis de confirmer par PCR
quantitative en temps réel l’expression préférentielle des 9 gènes dans ces cellules dont hmp19
et pcdh1 . Le clonage des fragments d’ADNc correspondants a permis d’initier l’étude de la
localisation cellulaire de leurs transcrits par hybridation in toto. Les gènes hmp19 et pcdh1
codent pour des protéines membranaires conservées au cours de l’évolution qui pourraient
être utiles pour la caractérisation ou l’isolement des cellules germinales souches chez les
poissons.